逍遥狂骑(站内联系TA)要提高退火温度吧，增强特异性空谷幽风(站内联系TA)没有目的条带，100bp的条带有可能是引物二聚体哦，降低一下退火温度，再扩不出来就重新设计引物吧12zhangwei(站内联系TA)如果只是扩增某个基因，在300-400bp有你想要的条带先连载体测序一下，有点非特异扩增也没关系。要是没有你的目的条带认真看设计的引物，blast一下，或调整退火温度icosahedron(站内联系TA)1 是否目的基因的浓度太低，以至于扩不出来？用个内参引物验证下cDNA的质量。2 引物的问题，有时候引物不对劲，横劈竖劈就是不出来，只能重新设计引物了。3 PCR体系的问题？没有找到最适扩增条件，可以尝试做梯度PCR，以及更改Mg离子浓度。4 第二种情况的可能性最大。